T: Los biomarcadores de activación de macrófagos y las señales de peligro inmunitario predicen resultados clínicos en la hepatitis alcohólica.
O: -Cuantificar aumentos de los indicadores en la translocación microbiana intestinal en pacientes con Hepatitis Alcohólica aguda.
-Aumento de células inmunitarias como respuesta al daño: sCD14 y OPN principalmente.
M: Plasma del paciente: sangre periférica.
AN: ADN ribosómico bacteriano extraído por método químico: lisozima, proteinasa K y proteasa con el Kit de aislamiento de ADN Qiagen. También se usa el método físico: shock térmico (elevadas temperaturas).
G: Secuencia no específica del ADN ribosomal 16 S bacteriano: 5 ′ - TCC TAC GGG AGG CAG CAG T-3 ′ - 19 PB; gen que codifica lipopolisacáridos.
PCR: RT-PCR (PCR en tiempo real), 40 ciclos:
D: 91 °C por 1 minuto
H: 55 °C por 1 minuto
E: 72 °C por 2 minutos
V: EFO y para los lipopolisacáridos se utilizó el kit de cuantificación de endotoxina cromogénica LAL.
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